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      1. 高壓蒸汽滅菌的操作步驟

          高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內,通過(guò)加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續加熱,此時(shí)由于蒸汽不能溢出,而增加了滅菌器內的壓力,從而使沸點(diǎn)增高,得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。
          在同一溫度下,濕熱的殺菌效力比干熱大,其原因有三:一是濕熱中細菌菌體吸收水分,蛋白質(zhì)較易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低,二是濕熱的穿透力比干熱大;三是濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時(shí),由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被滅菌物體的溫度,從而增加滅菌效力。
          一般培養基用1.05kg /cm2,121.3℃15—30分鐘可達到徹底滅菌的目的。滅菌的溫度及維持的時(shí)間隨滅菌物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變。例如含糖培養基用0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃滅菌15分鐘,但為了保證效果,可將其他成分先行121.3℃,20分鐘滅菌,然后以無(wú)菌操作手續加入滅菌的糖溶液。又如盛于試管內的培養基以1.05kg/cm2,121.3℃滅菌20分鐘即可,而盛于大瓶?jì)鹊呐囵B基最好以1.05kg/cm2滅菌30分鐘。
            實(shí)驗室中常用的高壓蒸汽滅菌鍋有立式、臥式和手提式等幾種。本實(shí)驗介紹手提式高壓蒸汽滅菌鍋的使用方法。

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