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      1. 玉米葉綠素含量的測定

             葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素,必不可少。葉綠素含量的測定是實(shí)驗室的重要項目之一,如采用化學(xué)方法Arnon法,分光光度計法,葉綠素測量?jì)x等,不一而足。迄今為止,在實(shí)際應用中,我們通常采用葉綠素測量?jì)x,因為其方便快捷,而且精確度高,方便攜帶。受到廣泛農業(yè)工作者、科研院所的青睞。
              分光光度計法測定結果準確可靠,但是在測定時(shí)需要損傷葉片和組織,不利于對植株的系統研究。葉色值反映了植物葉片的綠色程度,與葉綠素含量存在一定的相關(guān)性。
        葉綠素測量?jì)x是一種專(zhuān)門(mén)用于測定植物葉綠素含量的儀器,該儀器有多家廠(chǎng)商生產(chǎn)銷(xiāo)售,其中以日本柯尼卡美能達公司的SPAD-502最為高端和暢銷(xiāo)。河南云飛科技發(fā)展有限公司作為日本柯尼卡美能達公司的特約一級代理商,也提供葉綠素測量?jì)x的銷(xiāo)售工作。葉綠素測量?jì)x的測定原理是:測量葉子在紅色區域和近紅外區域的吸收率。通過(guò)這兩部分區域的吸收率,來(lái)計算出一種SPAD值,它是用數字來(lái)表示目前和葉子中葉綠素含量相對應的參數。因為葉綠素在藍色區域(400—500nm)和紅色區域(600—700nm)范圍內吸收達到了峰值,但在近紅外區域卻沒(méi)有吸收。另外,葉綠素測量?jì)x還具有反應氮元素含量的作用。
              玉米葉綠素含量的測定有兩種方法。葉綠素計法:利用日本產(chǎn)的SPAD-502葉綠素測量?jì)x于花期對玉米功能葉片中部進(jìn)行活體測定。每個(gè)材料取3個(gè)葉片,最后求平均值。分光光度計法:將葉綠素計法測定完的葉片取回進(jìn)行分光光度計法測定。用毛刷刷去表面雜質(zhì),用水沖洗,擦干,備用。每個(gè)葉片在中部用直徑9 mm打孔器打孔,取6個(gè)圓形葉片,稱(chēng)重后放于15 mL試管,用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h,浸泡過(guò)程中每天混勻2次,葉片完全變白后進(jìn)行比色,于665、649、470 nm波長(cháng)測量光密度值,計算葉綠素含量,取3個(gè)葉片的平均值作為該材料的含量值。計算公式為:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245

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